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全自動(dòng)多肽合成儀操作流程

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全自動(dòng)多肽合成儀的操作流程通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟:


一、前期準(zhǔn)備

1.選擇合適的樹(shù)脂和氨基酸:根據(jù)所需合成的多肽序列,選擇適合的樹(shù)脂和氨基酸。

2.設(shè)備調(diào)試:由專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行設(shè)備的安裝和調(diào)試,確保設(shè)備能夠正確運(yùn)行。

3.編程:根據(jù)多肽序列,在合成儀的軟件系統(tǒng)中編寫(xiě)合成程序。


二、合成步驟

1.脫保護(hù):去除前一個(gè)氨基酸的保護(hù)基團(tuán),使其能夠與下一個(gè)氨基酸發(fā)生反應(yīng)。這一步驟通常使用溶劑(如哌啶)來(lái)去除Fmoc(9-芴甲氧羰基)保護(hù)的氨基基團(tuán)。

2.活化與偶聯(lián):將下一個(gè)氨基酸的羧基活化,然后與被脫保護(hù)的氨基反應(yīng),形成肽鍵。這一步驟通常使用活化劑(如HBTU或TBTU)和DIEA來(lái)促進(jìn)反應(yīng)。

3.洗滌:清洗掉未反應(yīng)的物質(zhì)和副產(chǎn)物,確保反應(yīng)的純度。這一步驟通常使用DMF等有機(jī)溶劑進(jìn)行洗滌。

4.循環(huán):重復(fù)脫保護(hù)、活化與偶聯(lián)以及洗滌的步驟,直到多肽鏈達(dá)到預(yù)定長(zhǎng)度。


三、后處理

1.切割:將合成的多肽從樹(shù)脂上切割下來(lái)。這一步驟通常使用酸性試劑(如TFA)進(jìn)行切割。

2.提純:通過(guò)高效液相色譜(HPLC)等方法對(duì)切割下來(lái)的多肽進(jìn)行提純,得到目標(biāo)多肽。

3.干燥與保存:將提純后的多肽進(jìn)行干燥處理,并妥善保存以備后續(xù)使用。

四、注意事項(xiàng)

1.操作規(guī)范:嚴(yán)格按照合成儀的操作手冊(cè)進(jìn)行操作,避免誤操作導(dǎo)致設(shè)備損壞或合成失敗。

2.安全防護(hù):在操作過(guò)程中佩戴好防護(hù)用品,如手套、口罩等,避免有機(jī)溶劑等有害物質(zhì)對(duì)皮膚和呼吸道造成傷害。

3.質(zhì)量控制:在合成過(guò)程中要嚴(yán)格控制每一步的反應(yīng)條件和反應(yīng)時(shí)間,確保合成產(chǎn)物的質(zhì)量和純度。


綜上所述,全自動(dòng)多肽合成儀的操作流程是一個(gè)復(fù)雜而精細(xì)的過(guò)程,需要嚴(yán)格按照操作手冊(cè)進(jìn)行規(guī)范操作,并注意安全防護(hù)和質(zhì)量控制。

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